产品注册号：沪食药监械（准）字2005第2401204号
产品标准号：沪/YBZ-0971－40－2005
碱性磷酸酶(ALP)测定试剂盒（AMP法）
使用说明书
用途
本品用于血清或血浆中碱性磷酸酶（ALP）的体外测定。
临床意义
碱性磷酸酶主要存在于肝脏、骨、胎盘、肠和乳腺。在儿童骨骼生长期或妇女妊娠期（胎盘分泌），此酶均会正常升高。正常成人的碱性磷酸酶大多由肝脏产生。碱性磷酸酶含量增高见于：肝脏疾病如胆汁凝结和肝硬化、骨骼疾病如软骨病、佝偻病、成骨肉瘤、恶性肿瘤等。碱性磷酸酶含量降低见于：骨停止生长（克汀氏病、软骨发育不全）、先天性低磷酸酶血症等。
原 理
血清中碱性磷酸酶在碱性条件下将磷酸-4-硝基苯酚中的磷酸基转移到2-氨基-2甲基-1-丙醇（AMP）并释放4-硝基苯酚。在405nm处测定4-硝基苯酚生成的速率，即可算出ALP活性。
磷酸-4-硝基苯酚 + AMP → AMP-磷酸 + 4-硝基苯酚
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试剂规格 货号 |
规格1 |
规格2 |
规格3 |
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试剂 1 |
2×40ml |
4×60ml |
2×80ml |
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试剂 2 |
2×10ml |
2×30ml |
2×20ml |
试剂成份
R1： AMP 1.0 mmol/L，硫酸锌 1.5 mmol/L，醋酸镁 2.5 mmol/L，
N-羟乙基乙二胺三乙酸（HEDTA） 2.5mmol/L。
R2：磷酸-4-硝基苯酚 100 mmol/L，氯化镁10.5 mmol/L
适用仪器
适用于各种类型半自动、全自动临床生化分析仪。
工作液
将试剂1和试剂2按照4：1的比例混匀。2-8℃条件下可稳定7天。
样本
不溶血的血清或肝素抗凝血浆，建议收集的血清在4小时内完成测定。
测试程序
本试剂适用于生化分析仪测定，也可用于手工.半自动操作，测定波长405nm。
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1．工作液（标本启动） 样本(S) |
20μl |
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工作液 |
1000μl |
2．双试剂（底物启动）
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2．双试剂（底物启动） 试剂(R1) |
1000μl |
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样本(S) |
20μl |
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充分混匀，37℃孵育1-5分钟后 | |
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试剂（R2） |
250μl |
混匀，1分钟后读取各吸光度，然后每隔1分钟记录一次，共3分钟。计算平均变化吸光度（ΔA/min）
计算
ALP (U/L) = ΔA/min ×F因子
F因子＝ TV×1000 /18.8×SV×P
式中 TV＝总反应体积（ml） , SV＝样本体积（ml）
18.8＝对硝基苯酚在405nm处的毫摩尔消光系数 , P＝比色杯光径（cm）
ALP (U/L) = ΔA/min × 3191(样品启动),ALP (U/L) = ΔA/min × 3378 (底物启动)
F值在不同的生化仪上可能有不同，建议各实验室建立自己的F值。
自动分析
实验参数：（仪器型号：日立7060C型全自动生化分析仪）
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温 度 |
37℃ |
样品用量 |
4μl |
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波 长 |
405nm |
试剂用量R1/R2 |
200μl/50μl |
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延迟时间 |
60 秒 |
测定时间 |
120 秒 |
参考值
26-117 U/L；此范围仅供参考，各实验室须建立本室的正常参考值范围。
试剂特性
本试剂线性范围可达1000 U/L。在自动生化分析仪上，线性范围取决于所用样本量与试剂量的比例和测量的时间。
注意事项
1. 样本采集后应尽快分离测定。即使是密封冷暗处保存的血清，在24小时后其活性也会上升5％-10％。
2. 溶血会产生轻微负误差。
3. 根据不同仪器的要求，试剂与样本用量可按比例改变。
4. 标本要避免使用EDTA、柠檬酸盐、草酸盐、氟化物等抗凝的血浆，但用肝素抗凝的血浆可以使用。
5. 本产品在日立7060C型全自动生化分析仪上通过第三方检测，用于其他仪器需进行验证。本公司备有多种仪器上机参数供参考。
有效期
试剂盒自生产日起避光储存于2-8℃可稳定十二个月。
参考文献
1. Massion C, Clin Chem 18, 366 (1972)
2. Young, D. S., et al. Clin. Chen. 21:1d (1975)
生产单位：上海荣盛生物技术有限公司
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邮编：200231
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